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人γ氨基丁酸（GABA）ELISA 試劑盒*啦！

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檢測原理：

試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被人γ氨基丁酸（GABA）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯
色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人γ氨基丁酸（GABA）呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

操作步驟：

1. 從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回 4℃。

2. 設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品 50μL；

3. 待測樣本孔先加待測樣本 10μL，再加樣本稀釋液 40μL；

4. 隨后標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體 100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。

5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置 1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板 5 次（也可用洗板機洗板）。

6. 每孔加入底物 A、B 各 50μL，37℃避光孵育 15min。

7. 每孔加入終止液 50μL，15min 內(nèi)，在 450nm 波長處測定各孔的OD 值。

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操作時注意事項：

1. 試劑盒保存在 2-8℃，使用前室溫平衡 20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶，這屬于正?，F(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再使用。
 

2. 實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。
 

3. 預處理后的樣本無需稀釋，直接取 10μL 加樣即可。
 

4. 嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
 

5. 所有液體組分使用前充分搖勻。

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