羅丹明123溶液(0.5mg/ml)檢測(cè)方法!
Rhodamine 123是一種可以通過(guò)細(xì)胞膜的選擇性染色活細(xì)胞線粒體的熒光染料,呈黃綠色熒光。廣泛用作檢測(cè)線粒體膜電位,也常用于細(xì)胞凋亡檢測(cè)。它可以快速通過(guò)細(xì)胞膜,僅需幾分鐘就可以被具有活性的線粒體所俘獲,并且對(duì)細(xì)胞沒(méi)有任何毒性。
Rh123用于對(duì)許多種細(xì)胞進(jìn)行染色,包括植物細(xì)胞和細(xì)菌。由于細(xì)胞內(nèi)ATP的量與Rh123的熒光強(qiáng)度之間有相關(guān)性,因此Rh123被應(yīng)用于檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的ATP。
規(guī)格:100ul
保存:4℃,避光,
有效期:12個(gè)月
用途:線粒體膜電位檢測(cè)
說(shuō)明:主要由羅丹明123、PBS組成,采用FACS檢測(cè),激發(fā)波長(zhǎng)511nm,發(fā)射波長(zhǎng)535nm。
染色程序:
(1) 將0.4mgRh123溶解到1mL DMSO中制備成1mMRh123-DMSO溶液。
(2) 用載玻片準(zhǔn)備細(xì)胞。細(xì)胞數(shù)目應(yīng)為5×104~5×105個(gè)/mL。
(3) 孵育該載玻片,用PBS或Hank's液洗滌細(xì)胞。
(4) 用培養(yǎng)基稀釋1mM Rh123溶液以制備1~20µM Rh123緩沖液。
(5) 將Rh123緩沖液加入載玻片并在37℃下孵育30分鐘至1小時(shí)。
(6) 去除Rh123緩沖液并用培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞(洗滌細(xì)胞后為了固定,加入10%福爾馬林緩沖液并孵育15~20分鐘,接著用PBS洗滌)。
(7) 用帶有熒光素濾光片的熒光顯微鏡觀察細(xì)胞。
羅丹明123溶液(0.5mg/ml)檢測(cè)方法!