超氧陰離子清除能力試劑盒規(guī)范操作很重要
超氧自由基,亦稱過氧自由基, superoxide radical, .O2-。人體內(nèi)產(chǎn)生的一種活性氧自由基,能引發(fā)體內(nèi)脂質(zhì)過氧化,加快從皮膚到內(nèi)部器官整個肌體的衰老過程,并可誘發(fā)皮膚病變、心血管疾病、癌癥等, 嚴(yán)重危害人體健康,人體通過超氧化物歧化酶(SOD)將其轉(zhuǎn)化成過氧化氫和氧氣除去。
產(chǎn)品說明:
超氧陰離子自由基作為生物體代謝過程中產(chǎn)生的一種自由基,可攻擊生物大分子,如脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、核酸和聚不飽和脂肪酸等,使其交鏈或者斷裂,引起細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的破壞,與機體衰老和病變有很密切的關(guān)系,清除超氧陰離子自由基的研究已經(jīng)得到了廣泛的關(guān)注。
AP-TEMED系統(tǒng)產(chǎn)生超氧陰離子,與鹽酸羥胺反應(yīng)生成NO2-,NO2-與對氨基苯磺酸和α-萘胺的作用生成紅色的偶氮化合物,在530nm處有特征吸收峰,樣品對超氧陰離子的清除能力與530nm 的吸光值呈負(fù)相關(guān)。
操作步驟: 一、樣品處理
1. 組織:按照質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g,加入1mL提取液)
加入提取液,冰浴勻漿后于4℃,10000g離心10min,取上清置于冰上待測。
2. 細(xì)胞:按照細(xì)胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)胞加入
1mL提取液),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后4℃,
10000g離心10min,取上清置于冰上待測。
3. 培養(yǎng)液或其它液體:直接檢測。
4. 粉劑藥物可配制成相同濃度,比如1mg/mL。
所謂自由基,是指帶有不配對的電子的分子基因。自由基的種類很多,用來說明衰老發(fā)生機制的自由基,主要是超氧自由基、羥自由基和類脂質(zhì)過氧化自由基。其中,超氧自由基作用的產(chǎn)物,都是強氧化劑,可使類脂質(zhì)中的不飽和脂肪酸氧化為類脂過氧化物。它們都是引發(fā)脂質(zhì)過氧化自由基反應(yīng)的氧化劑,在正常情況下,由于生物體內(nèi)存在自由基清除劑,如性激素、SOD、過氧化氫酶等使生物體內(nèi)自由基的產(chǎn)生與清除保持相對平衡,并參與許多正常的生理生化反應(yīng)。若自由基清除劑的合成惡性化或自由基反應(yīng)發(fā)生紊亂,則會導(dǎo)致機體一系列的病理改變。
超氧陰離子清除能力試劑盒規(guī)范操作很重要