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信帆生物-酵母轉(zhuǎn)化試劑盒酵母感受態(tài)細(xì)胞的制備

酵母感受態(tài)細(xì)胞的制備：

1.活化菌種。-80℃保存的菌種在固體YPDA培養(yǎng)基（YPDA加20g Agar/L）上劃線，在30℃培養(yǎng)2-4天。

2.挑取酵母單菌落在固體YPDA培養(yǎng)基上劃3-5 mm的duan線，在30 ℃培養(yǎng)2-4天。待酵母單菌落長至2 mm長時(shí)，接種。

3.首先把酵母細(xì)胞接種到3 ml液體YPDA培養(yǎng)基中，30℃過夜培養(yǎng)。

4.第二天轉(zhuǎn)接到含有30 ml液體YPDA培養(yǎng)基的三角瓶中繼續(xù)培養(yǎng)，待OD600到0.4-0.5范圍內(nèi)。收集細(xì)胞，1000 g，離心5 min, 去上清。

5.沉淀用30-50 ml的無菌的去離子水懸浮。1000 g，離心5 min，去上清。

6.沉淀用合適體積的100 mM LiAc懸?。?0 ml的酵母菌zui多用不超過1 ml的100 mM LiAc懸浮，通常100 μl的酵母細(xì)胞用于轉(zhuǎn)化一個(gè)質(zhì)粒，即一個(gè)反應(yīng)）。

7.把酵母細(xì)胞的懸浮液分裝到1.5 ml的離心管中，每管分裝100 μl，用于轉(zhuǎn)化一個(gè)質(zhì)粒即一個(gè)反應(yīng)。1000 g，離心5 min，去上清。制備好的感受態(tài)細(xì)胞備用。

注意事項(xiàng)：

1. 初次使用Carrier DNA，請把裝有Carrier DNA的管子在沸水中煮沸5 min，然后立即放在冰上，用后放在-20℃儲(chǔ)存?zhèn)溆?。下次使用時(shí)請?jiān)诒辖鈨鯟arrier DNA。

2. PEG溶液在低溫環(huán)境下會(huì)析出，請于常溫環(huán)境下*溶解后使用。

3. 轉(zhuǎn)化全程要無菌操作。

信帆生物公司主要代理產(chǎn)品：
ELISA試劑盒：進(jìn)口ELISA試劑盒,國產(chǎn)ELISA試劑盒,人elisa試劑盒，大鼠ELISA試劑盒，小鼠ELISA試劑盒等。
培養(yǎng)基：微生物培養(yǎng)基,顯色培養(yǎng)基,BD培養(yǎng)基,gibco培養(yǎng)基等。
血清：胎牛血清,人血清,動(dòng)物血清，NQBB,Hyclone，Gbico原裝血清 。
生物試劑：Amresco,Sigma,ABM,BIO-RAD,BD,ABCAM等進(jìn)口試劑。

標(biāo)準(zhǔn)品對照品：進(jìn)口對照品,進(jìn)口對照藥材,進(jìn)口標(biāo)準(zhǔn)品.
抗體：一抗,二抗，流式抗體等。
放免試劑盒：進(jìn)口放免試劑盒，國產(chǎn)放免試劑盒，進(jìn)口美國鳳凰等放免試劑盒。
實(shí)驗(yàn)室代測服務(wù)：放免代測，WB實(shí)驗(yàn)，免疫組化代測，熒光定量PCR代測，病理細(xì)胞染色代測，生化實(shí)驗(yàn)代測等。

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