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R2A瓊脂培養(yǎng)基檢測方法和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)
更新時間:2020-06-10   點擊次數(shù):929次

R2A瓊脂培養(yǎng)基檢測方法和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

 

產(chǎn)品介紹:

R2A瓊脂培養(yǎng)基用于純化水中菌落總數(shù)的測定,(EP、USP、Chp標(biāo)準(zhǔn))

 

中國藥典

【檢查】 微生物限度 取本品不少于 1ml,按薄膜過濾法處理后,采用 R2A 瓊脂培養(yǎng)基,30~35℃培養(yǎng)不少于 5 天,依法檢查(通則 1105),每1ml 供試品中需氧菌總數(shù)不得過 100cfu。

操作簡述:

除葡萄糖、瓊脂外,取上述成分,混合,微溫溶解,調(diào)節(jié) pH 值使加熱后在 25℃的 pH值為 7.2±0.2,加入瓊脂,加熱溶化后,再加入葡萄糖,搖勻,分裝,滅菌。 R2A 瓊脂培養(yǎng)基適用性檢查試驗 照通則 1105 中“計數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查”的胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基的適用性檢查方法進(jìn)行,試驗菌株為銅綠假單胞菌和枯草芽孢桿菌。應(yīng)符合規(guī)定。

 

USP標(biāo)準(zhǔn)

在美國藥典中,推薦使用0.45μm薄膜過濾法,并同時使用高營養(yǎng)培養(yǎng)基(平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基(PCA))于30-35℃培養(yǎng)72小時以上,和低營養(yǎng)培養(yǎng)基(R2A瓊脂)于20-25℃培養(yǎng)96小時以上。檢測標(biāo)準(zhǔn)為:≤100cfu/ml 。

操作簡述:(可根據(jù)實際情況調(diào)整)

量取10ml充分混勻的水樣,以無菌操作加入安裝好的薄膜過濾器內(nèi),過濾。并用 pH7.0的無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液沖洗濾膜,每張濾膜每次沖洗量為100ml,共沖洗1次。過濾后,取出濾膜,正面朝上貼于瓊脂平板上。共制備 2張濾膜,一張濾膜貼于平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基平板(高營養(yǎng)培養(yǎng)基)置30℃~35℃生化培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng)2~3天,計數(shù)。另一張濾膜貼于R2A瓊脂平板(低營養(yǎng)培奍基),置20℃~25℃生化培養(yǎng)箱倒置培養(yǎng)5~7天,計數(shù)。以培養(yǎng)基平板上菌落數(shù)生長較多者作為檢測結(jié)果, 按比例折算為1ml純化水中的微生物數(shù)量后報告。
 

EP標(biāo)準(zhǔn)

在歐洲藥典中使用薄膜過濾法(0.45μm 孔徑濾膜),使用 R2A 瓊脂培養(yǎng)基在 30℃~35℃培養(yǎng) 5 天以上。 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn):≤100cfu/mL。

操作簡述:(可根據(jù)實際情況訓(xùn)整)

量取 10ml 充分混勻的水樣,以無菌操作加入 安裝好的薄膜過濾器內(nèi),過濾。并用 pH7.0 的無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液沖洗濾膜,每張濾膜 每次沖洗量為 100ml,共沖洗 1 次。過濾后,取出濾膜,正面朝上貼于 R2A 瓊脂平板上, 置 30℃~35℃生化培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng) 5 天,計數(shù)。按比例折算為 1ml 純化水中的微生物數(shù)量后 報告。

 

R2A瓊脂培養(yǎng)基檢測方法和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

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