抗酸染色液染色程度可通過(guò)時(shí)間或溫度適當(dāng)調(diào)整
抗酸染色用于細(xì)菌標(biāo)本涂片或菌落涂片的染色。常用于對(duì)分枝桿菌屬進(jìn)行初步鑒別。普通細(xì)菌染色比較容易著色,而分支桿菌細(xì)胞壁含脂質(zhì)較多,染色比較困難,必須加熱才能被石炭酸復(fù)紅著色。分枝桿菌菌體著色后,能抵抗鹽酸酒精等酸性脫色劑的脫色,而其他細(xì)菌和細(xì)胞等均被脫色。當(dāng)再用堿性美藍(lán)復(fù)染后,分支桿菌仍為紅色,其他細(xì)菌與背景呈藍(lán)色。
1、 做一適當(dāng)厚度的涂片,干燥后火焰固定。
2、 滴加抗酸染色液 A 于玻片上,覆蓋住樣本,在酒精燈上加熱,切勿沸騰,出現(xiàn)蒸汽即暫時(shí)移開,必要時(shí)可續(xù)加染色劑以免干涸。加熱 3-5 分鐘。
3、 移開火,靜置 5 分鐘,待標(biāo)本冷卻后以自來(lái)水沖洗。
4、 用抗酸染色液 B 脫色(大約 1 分鐘)至無(wú)紅色染液脫出為止。*脫色可避免產(chǎn)生假陽(yáng)性結(jié)果。
5、 自來(lái)水緩慢沖洗后,滴加抗酸染色液 C 復(fù)染約 30 秒,水洗。
6、 待干后油鏡觀察
注意事項(xiàng):
1. 染色程度可通過(guò)改變?nèi)旧珪r(shí)間或染色溫度做適當(dāng)調(diào)整。
2. 每次試劑用完后,請(qǐng)迅速蓋好,以免揮發(fā)。
3. 本產(chǎn)品有一定的刺激性和腐蝕性,使用時(shí)請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
在我們做生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)或者某些物理化學(xué)實(shí)驗(yàn)時(shí),為了更好地觀察到實(shí)驗(yàn)效果,通常會(huì)選用合理的染色劑,在選擇適當(dāng)?shù)娜旧珓┖?,我們就能夠很好地觀察到預(yù)期的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象或結(jié)果。染色劑依據(jù)來(lái)源可分為天然染色劑和人工合成染色劑,各種不同的實(shí)驗(yàn)選擇不同的染色劑,同一種染色劑也可以用不同的配方進(jìn)行調(diào)配制成。
天然染料
1、蘇木精 蘇木精是從南美的蘇木(熱帶豆科植物)干枝中用乙醚浸制出來(lái)的一種色素,是常用的染料之一。蘇木精不能直接染色,必須暴露在通氣的地方,使他變成氧化蘇木精(又叫蘇木素)后才能使用,這叫做“成熟”。蘇木精的“成熟”過(guò)程需時(shí)較長(zhǎng),配置后時(shí)間愈久,染色力愈強(qiáng)。被染材料必須經(jīng)金屬鹽作媒劑作用后才有著色力。所以在配制蘇木精染劑時(shí)都要用媒染劑。常用的媒染劑有硫酸鋁銨、鉀明礬和鐵明礬等。
蘇木精是淡黃色到銹紫色的結(jié)晶體,易溶于酒精,微溶于水和甘油,是染細(xì)胞核的優(yōu)良材料,他能把細(xì)胞中不同的結(jié)構(gòu)分化出各種不同的顏色。分化時(shí)組織所染的顏色因處理的情況而異,用酸性溶液(如鹽酸—酒精)分化后呈紅色,水洗后仍恢復(fù)青藍(lán)色,用堿性溶液(如氨水)分化后呈藍(lán)色,水洗后呈藍(lán)黑色。
2、洋紅 洋紅又叫胭脂紅或卡紅。一種熱帶產(chǎn)的雌性胭脂蟲干燥后,磨成粉末,提取出蟲紅,再用明礬處理,除去其中雜質(zhì),就制成洋紅。單純的洋紅不能染色,要經(jīng)酸性或堿性溶液溶解后才能染色。常用的酸性溶液有冰醋酸,堿性溶液有氨水、硼砂等。
洋紅使細(xì)胞核的優(yōu)良染料,染色的標(biāo)本不易褪色。用作切片或組織塊染都適宜,尤其適宜于小型材料的整體染色。用洋紅配成的溶液染色后能保持幾年。洋紅溶液出現(xiàn)渾濁時(shí)要過(guò)濾后再用。
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