乳酸脫氫酶(LDH)檢測試劑盒哪種方法更簡單
乳酸脫氫酶(LDH)存在于人體各組織器官中。LDH是機體能量代謝中的一種重要酶,LDH質(zhì)與量的改變,直接影響到機體的能量代謝,當機體各組織器官病變時,其組織器官本身的LDH要發(fā)生改變,并且可引起血液中LDH改變。
LDH增高主要見于急性心肌梗塞、病毒性肝炎、肝硬化、肺梗塞、某些惡性腫瘤、骨骼肌病、有核紅細胞骨髓內(nèi)破壞(無效性造血)、白血病尤其是急性淋巴細胞型白血病、惡性貧血。
在具有尿毒癥的慢性腎病患者,血清LDH一般正常,經(jīng)透析治療后活性上升,可能與血清中LDH的抑制劑尿素、草酸鹽被除去有關。
產(chǎn)品簡介:
LDH(EC 1.1.1.27)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,是糖酵解途徑的末端酶,催化丙酮酸與乳酸之間的可逆反應,伴隨著 NAD+/NADH 之間互變。LDH 催化 NAD+氧化乳酸生成丙酮酸,丙酮酸進一步與 2, 4 - 二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙,在堿性溶液中顯棕紅色,顏色深淺與丙酮酸濃度成正比。
試驗中所需的儀器和試劑:
可見分光光度計、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1mL 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
操作步驟:
一、樣品測定的準備:
1. 細菌或培養(yǎng)細胞:收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清,按照細菌或細胞數(shù)量(10
4個):提取液體積(mL)為 500-1000:1 的比例(建議 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,
功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次),8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
2. 組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5-10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液),進行冰浴勻漿;8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
3. 血清(漿)樣品:直接檢測。
產(chǎn)品優(yōu)點如下:
1、快速簡便:全程約40分鐘。
2、取樣量微:本法取樣量10ul~50ul即可測LDH活力
3、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放3個月有效。
4、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.5%。
5、回收試驗: X =101%。
6、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復性強。
7、測試面廣:血清(漿)、組織、灌流液、培養(yǎng)細胞以及細胞培養(yǎng)液等
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