SDS-PAGE凝膠配制試劑盒試劑使用量
描述:本產品提供了配制SDS-PAGE凝膠所需的各種試劑,用戶只需自備制膠器具和蒸餾水,即可配制高質量的各種濃度的變性PAGE膠,方便,快捷。本試劑盒至少可以配制30塊常規(guī)大小的PAGE膠,并且其中的分離膠緩沖液和濃縮膠緩沖液中已加入10%SDS,使用時無需另外加入。
灌制濃縮膠(試劑使用量參考附表3)
(1)去除覆蓋在分離膠上的水層,并用濾紙吸干,水份吸不干,可能會導致濃縮膠和分離膠分開。
(2)將不同體積的30%Acr-Bis(29:1)、分離膠緩沖液和雙蒸水在小燒杯中混合。
(3)加入10%APS和TEMED,輕輕攪拌混勻,避免產生氣泡。
(4)將濃縮膠溶液加至分離膠的上面,插入樣品梳,避免產生氣泡,靜置20-30min,直至濃縮膠聚合。
(5)待凝膠聚合后,小心拔下梳子,以免破壞加樣孔。
(6)進行常規(guī)電泳。
注意事項:
1.10%APS配置好后,應當-20℃保存,并且應盡量減少室溫存放時間,以防失效。
2.TEMED易揮發(fā),使用后請擰緊瓶蓋。
3.凝膠凝聚的速度與溫度等關系密切,可通過調節(jié)APS和TEMED的用量,控制凝膠的聚合速度,凝膠聚合過快不利于操作。
4.丙烯酰胺,TEMED等有毒,操作時請穿實驗服并戴手套。
5.在凝膠配制過程中,應盡量避免產生氣泡。
6.在分離膠上層加蒸餾水時要小心操作,加水時速度不宜過快。
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