葡聚糖凝膠系列產(chǎn)品操作方法快收藏
葡聚糖凝膠是一種珠狀的凝膠,含有大量的羥基,很容易在水中和電解質(zhì)溶液中溶脹。親水基質(zhì)使其非特異性吸附小化,并在生物分子分離期間得到較高的回收率。G 型的葡聚糖凝膠有各種不同的交聯(lián)度,因此它們的溶脹度和分級(jí)分離范圍也有所不同。葡聚糖凝膠的溶脹度基本上不因鹽和洗滌劑的存在而受影響。
使用方法
Sephadex 系列產(chǎn)品以干粉形式存在,使用前必須溶脹,在膨脹期間應(yīng)避免過(guò)度攪拌,因?yàn)樗赡芷茐奶盍?,不要使用磁力攪拌器?/p>
1、填料的準(zhǔn)備
(1)將填料在過(guò)量去離子水或緩沖液中,室溫條件下膨脹 24 小時(shí),或用熱水膨脹 1 小時(shí)。洗脫緩沖液不應(yīng)含有高粘度的試劑。溶脹過(guò)程中,如果上層有漂浮物,請(qǐng)去除。
(2)將溶脹好的填料,所有的緩沖液等材料平衡至實(shí)驗(yàn)操作溫度,對(duì)所有的緩沖液進(jìn)行脫氣處理。
2、裝柱
(1)檢查層析柱所有部件,特別是過(guò)濾網(wǎng),密封圈,螺旋塞是否緊密,玻璃管是否干凈和完整。
(2)將柱內(nèi)及柱子底端用水或緩沖液潤(rùn)濕并保持一小段液位,務(wù)必使底端無(wú)氣泡。
(3)用玻璃棒引導(dǎo)勻漿沿著柱內(nèi)壁一次性倒入柱內(nèi),注意勿使產(chǎn)生氣泡。打開(kāi)柱子出液口,使凝膠在柱內(nèi)自由沉降,連結(jié)好柱子頂端柱頭。
(4)打開(kāi)蠕動(dòng)泵,讓緩沖液用使用時(shí)流速的 1.33 倍的流速流過(guò),使柱床穩(wěn)定(注意壓力不要超過(guò)填 料大耐壓)。
注意事項(xiàng):
(1)上樣之前,樣品必須經(jīng)過(guò)膜過(guò)濾及去除色素,否則雜質(zhì)及色素會(huì)被吸附到填料上,影響填料的 正常使用。所有的緩沖液均需要用 0.45um 的過(guò)濾器過(guò)濾。
(2)在使用過(guò)程中,避免使用高濃度的強(qiáng)酸強(qiáng)堿,酸和堿的濃度應(yīng)低于 0.1 摩爾。堿會(huì)使流速變慢。