紅細(xì)胞裂解液使用操作指南
紅細(xì)胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer,或稱 ACK Lysis Buffer)是一種去除紅細(xì)胞最簡便易行的方法,即用裂解液裂解紅細(xì)胞,它既不損傷有核細(xì)胞又能充分的去除紅細(xì)胞。裂解液裂解是一種比較溫和的紅細(xì)胞去除方法,主要用于經(jīng)酶消化分散的組織細(xì)胞的分離純化,淋巴細(xì)胞的分離純化以及組織細(xì)胞蛋白與核酸提取等實(shí)驗(yàn)中紅細(xì)胞的去除。經(jīng)紅細(xì)胞裂解液裂解得到的組織細(xì)胞中不含紅細(xì)胞,可進(jìn)一步用于原代培養(yǎng)、細(xì)胞融合、流式細(xì)胞分析、核酸與蛋白的分離和提取等。
產(chǎn)品名稱:紅細(xì)胞裂解液
英文名稱:Red Blood Cell Lysis Buffer
規(guī)格:100ml
儲(chǔ)存條件:2-8℃保存
使用說明:
1. 1倍體積的新鮮全血,加入3倍體積的紅細(xì)胞裂解液。如1ml新鮮全血加入3ml紅細(xì)胞裂解液,輕輕渦旋或顛倒混勻。
2. 冰上放置15分鐘,其間輕輕渦旋混勻兩次,紅細(xì)胞裂解后,溶液應(yīng)該是清亮透明的。
3. 收集細(xì)胞:4℃,450×g離心10分鐘以沉淀白細(xì)胞,小心吸棄上清液。
4. 向白細(xì)胞沉淀中加入兩倍體積的紅細(xì)胞裂解液,輕輕渦旋充分重懸白細(xì)胞。如起始血液為1ml,則加入2ml的紅細(xì)胞裂解液。
5. 4℃,450×g離心10分鐘沉淀白細(xì)胞,小心并徹底吸去上清液。
6. 重懸細(xì)胞,用于后續(xù)實(shí)驗(yàn);如提取RNA,最好于此步開始使用DEPC水配制的溶液進(jìn)行操作。 (組織細(xì)胞處理:新鮮組織經(jīng)胰酶或膠原酶等消化分散成單個(gè)細(xì)胞懸液,離心棄去上清液,其余同上。)
注意事項(xiàng):
1、本產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)用,不做其它用途。
2、本裂解液為無菌產(chǎn)品,分離細(xì)胞用于細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)請注意無菌操作。
3、為了您的安全與健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。