關(guān)于糖原PAS染色液(Periodic Acid-Schiff stain,即過碘酸雪夫染色液),以下是一些科普信息:
一、定義與原理
定義:糖原PAS染色液是一種在組織學(xué)、病理學(xué)等領(lǐng)域廣泛使用的特殊染色方法,主要用于檢測組織中的糖原及其他多糖物質(zhì)。
原理:糖原PAS染色法的基本原理是利用高碘酸(一種強(qiáng)氧化劑)將多糖分子中相鄰的二醇基氧化成二醛基,然后二醛基與Schiff試劑(一種含有無色品紅的溶液)反應(yīng)生成紅色不溶性復(fù)合物。這種紅色復(fù)合物定位于胞漿上,從而顯示出組織中的糖原和多糖物質(zhì)。
二、操作步驟
糖原PAS染色液的操作步驟大致如下:
標(biāo)本制備:樣本通常需要經(jīng)過固定、脫水、透明、浸蠟、包埋、切片等步驟制成組織切片或細(xì)胞涂片。
脫蠟至水:如果是石蠟切片,需要先進(jìn)行脫蠟處理,然后用蒸餾水洗滌。
高碘酸處理:用高碘酸溶液處理切片或涂片,使多糖分子中的二醇基氧化成二醛基。
Schiff試劑染色:將處理過的切片或涂片置于Schiff試劑中染色,使二醛基與Schiff試劑反應(yīng)生成紅色復(fù)合物。
蘇木素復(fù)染:用蘇木素對細(xì)胞核進(jìn)行復(fù)染,使細(xì)胞核呈現(xiàn)藍(lán)色。
脫水、透明、封固:完成染色后,進(jìn)行常規(guī)的脫水、透明和封固處理,制成永久性的組織切片或細(xì)胞涂片。
三、染色結(jié)果
糖原PAS染色法的染色結(jié)果通常為:組織中的糖原和多糖物質(zhì)呈現(xiàn)紫紅色,細(xì)胞核呈現(xiàn)藍(lán)色。這種鮮明的顏色對比使得觀察結(jié)果更加清晰、準(zhǔn)確。
四、應(yīng)用范圍
糖原PAS染色法在組織學(xué)、病理學(xué)等領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用價值。它不僅可以用于檢測組織中的糖原和多糖物質(zhì),還可以用于診斷與糖原代謝相關(guān)的疾?。ㄈ缣窃鄯e?。?、心血管疾病(如心肌病變)、糖尿病等。此外,該染色法還可以用于觀察腎小球基底膜、結(jié)腸杯狀細(xì)胞中的中性黏液物質(zhì)、阿米巴滋養(yǎng)體和霉菌的著色等。
五、注意事項
高碘酸濃度和氧化時間:高碘酸是一種強(qiáng)氧化劑,使用時需要注意其濃度和氧化時間的控制,以避免過度氧化或不足氧化的情況發(fā)生。
染色液的保存:Schiff試劑和無水乙醇等染色液需要妥善保存,避免陽光直射和高溫環(huán)境,以確保其穩(wěn)定性和有效性。
操作規(guī)范:在進(jìn)行糖原PAS染色時,需要嚴(yán)格按照操作規(guī)范進(jìn)行,以避免因操作不當(dāng)導(dǎo)致的染色失敗或假陽性、假陰性結(jié)果的出現(xiàn)。