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人SV40轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞

人SV40轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞

產(chǎn)品時(shí)間:2023-02-01

簡(jiǎn)要描述:

產(chǎn)品名稱:人SV40轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞
英文名稱:hFOB1.19
培養(yǎng)基:hFOB1.19專用培養(yǎng)基:90%DMEM-H/F12+10%FBS+0.3mg/mlG418
形態(tài):成骨細(xì)胞,多角形,不規(guī)則形,無(wú)空泡,背景干凈,單層貼壁生長(zhǎng)
生長(zhǎng)條件:培養(yǎng)溫度34℃;氣體環(huán)境5%CO2+95%空氣
生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
儲(chǔ)存方式:液氮
本產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)用,不做其它用途!

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產(chǎn)品名稱:人SV40轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞

英文名稱:hFOB1.19

培養(yǎng)基:hFOB1.19專用培養(yǎng)基:90%DMEM-H/F12+10%FBS+0.3mg/mlG418

形態(tài):成骨細(xì)胞,多角形,不規(guī)則形,無(wú)空泡,背景干凈,單層貼壁生長(zhǎng)

生長(zhǎng)條件:培養(yǎng)溫度34℃;氣體環(huán)境5%CO2+95%空氣

生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)

儲(chǔ)存方式:液氮

應(yīng)用領(lǐng)域:這些細(xì)胞為研究人類正常的成骨細(xì)胞分化、成骨生理、激素、生長(zhǎng)因子以及其他細(xì)胞因子對(duì)成骨細(xì)胞功能和分化的影響提供了一個(gè)均勻、快速增殖的模型系統(tǒng)。在 33.5°C 的允許溫度下生長(zhǎng)的細(xì)胞表現(xiàn)出快速的細(xì)胞分裂(36 小時(shí)的倍增時(shí)間),而在 39.5°C 的限制溫度(96 小時(shí)的倍增時(shí)間)下幾乎不會(huì)發(fā)生細(xì)胞分裂。 這些細(xì)胞具有分化成表達(dá)正常成骨細(xì)胞表型的成熟成骨細(xì)胞的能力。在限制性溫度下,細(xì)胞分裂減慢,分化增加,并產(chǎn)生更成熟的成骨細(xì)胞表型。

代方法:

復(fù)蘇步驟:①凍存管從液氮或-80℃中取出放入PE手套中,迅速?zèng)]入37℃水浴鍋,搖晃凍存管加速溶解,以1分鐘內(nèi)全部溶解為宜;②在超凈臺(tái)中將溶解好的細(xì)胞液加入到裝有9ml犕耆嘌睦胄墓苣冢?000-1200rpm/min離心5分鐘,棄去上清液,用1-2mL*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。③然后將細(xì)胞懸液加入到含有5-6mL*培養(yǎng)基的T25瓶中,放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 細(xì)胞傳代:①將舊培養(yǎng)液吸除,PBS清洗兩遍后,加入1-2mL胰霉(0.25%Trypsin 0.02%EDTA);②鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(可用吸管吸起些許胰霉輕輕吹打細(xì)胞層某處,肉眼可見細(xì)胞層脫落,即消化完成,否則繼續(xù)消化),直接吸掉胰霉,加入5-6毫升*培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,把細(xì)胞層吹落,吹散。③將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的T25瓶中,添加適當(dāng)?shù)?培養(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。④注意培養(yǎng)基pH值變化和細(xì)胞密度,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%-90%時(shí),重復(fù)傳代操作或者凍存。

 

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