Ehrlich試劑顯色原理
細(xì)菌的生化試驗(yàn)(也稱生化反應(yīng))是指由于不同細(xì)菌具有各自的酶系統(tǒng)對底物的分解能力不同,由此產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物也不同,通過生物化學(xué)的方法測定這些代謝產(chǎn)物的過程。吲哚試驗(yàn)原理是某些具有氨酸酶的細(xì)菌能夠分解蛋白胨水中的氨酸生成吲哚(靛基質(zhì)) ,吲哚與對苯甲氨基甲醛結(jié)合,形成紅色化合物玫瑰吲哚。
使用方法:
1、將待檢細(xì)菌接種于培養(yǎng)基 ,置于恒溫培養(yǎng)箱。
2、沿試管壁緩慢加入少量乙mi或 =甲苯,搖勻試管以便提取和濃縮吲哚,直至紅色吲哚浮于培養(yǎng)基表面。
3、沿試管壁緩慢加入數(shù)滴 Ehrlich Reagent ,觀察其與培養(yǎng)基接觸面的顏色變化。
染色結(jié)果:
紅色
陽性 顏色無變化 陰性
注意事項(xiàng):
1、 培養(yǎng)細(xì)菌時(shí),注意避免污染。
2、 Ehrlich 試劑僅用于科研目的,不可用于臨床診斷。
3、 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作
細(xì)胞漿染色的原理:
伊紅是一種化學(xué)合成的酸性染料,在一定條件下可使細(xì)胞漿著色。細(xì)胞漿的主要成分是蛋白質(zhì),為兩性化合物,細(xì)胞漿的染色與染液的pH值密切相關(guān)。當(dāng)染色液pH值在胞漿蛋白質(zhì)等電點(diǎn)(4.7~5.0)以下時(shí),胞漿蛋白質(zhì)以堿式電離,則細(xì)胞漿帶正電荷,就可被帶負(fù)電荷的酸性染料染色。伊紅在水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子,與胞漿蛋白質(zhì)帶正電荷的陽離子結(jié)合,使細(xì)胞漿著色,呈現(xiàn)紅色。