細(xì)胞抗結(jié)團(tuán)試劑使用注意事項(xiàng)
產(chǎn)品描述
表達(dá)細(xì)胞系大多都會(huì)馴化使其適應(yīng)無（低）血清以及懸浮培養(yǎng)模式，從而達(dá)到更高的細(xì)胞密度來提高表達(dá)產(chǎn)量。但是馴化的前后過程中以及高密度懸浮培養(yǎng)的情況下，經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞之間互相粘附并結(jié)團(tuán)的現(xiàn)象。小規(guī)模細(xì)胞結(jié)團(tuán)期初并不影響細(xì)胞生長，但是隨著結(jié)團(tuán)變大，會(huì)導(dǎo)致內(nèi)層細(xì)胞營養(yǎng)不充分從而死亡。死亡后的細(xì)胞釋放內(nèi)容物會(huì)影響整體細(xì)胞生長，導(dǎo)致更大規(guī)模的死亡和結(jié)團(tuán)現(xiàn)象。
本試劑是一種化學(xué)成分確定、無蛋白質(zhì)以及無任何水解產(chǎn)物的濃縮型液體試劑，主要由分散劑和抗剪切保護(hù)劑兩部分組成。能夠提供良好的抗剪切力保護(hù)的同時(shí)，減少細(xì)胞間的粘附作用，明顯的改善細(xì)胞結(jié)團(tuán)現(xiàn)象，使得到更高的活細(xì)胞密度。
操作步驟
注意：以下方案為常規(guī)換液添加方案，使用過程中亦可直接添加到正在培養(yǎng)的細(xì)胞中。添加體積和下述體積比一致。
1. 將細(xì)胞抗結(jié)團(tuán)試劑添加至對(duì)應(yīng)細(xì)胞培養(yǎng)基中，添加體積為總體積的2%（不同條件下，所需抗結(jié)團(tuán)試劑量不同，通常1-4%之間，推薦2%，可視情況調(diào)整），混勻后配置成工作液；
2. 將懸浮細(xì)胞轉(zhuǎn)移至離心管中，800 g離心3-5 min，去除原有培養(yǎng)基，保留細(xì)胞沉淀；
3. 使用上訴含細(xì)胞抗結(jié)團(tuán)試劑的工作液重懸細(xì)胞，并轉(zhuǎn)移至相應(yīng)培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
注意事項(xiàng)
1. 本產(chǎn)品適用于搖床培養(yǎng)條件下馴化懸浮細(xì)胞體系，對(duì)常規(guī)靜置的懸浮細(xì)胞，作用可能不明顯。
2. 由于不同細(xì)胞間性質(zhì)不同，步驟中描述的使用濃度范圍僅供參考，可根據(jù)具體情況進(jìn)行調(diào)整。
3. 本產(chǎn)品會(huì)影響細(xì)胞轉(zhuǎn)染，建議轉(zhuǎn)染孵育前，更換為正常不含本產(chǎn)品的培養(yǎng)基。在轉(zhuǎn)染孵育完成后，換液時(shí)添加，不影響轉(zhuǎn)染后的表達(dá)。
4. 為了您的健康和安全，操作時(shí)請(qǐng)穿好實(shí)驗(yàn)服、戴好手套。
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