化學名：2-[4-(2-Hydroxyethyl)-1-piperazinyl]ethanesulfonic acid
分子式：C8H18N2O4S HEPES是一種非離子兩性緩沖液,其在pH 7.2 - 7.4 范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力。其zui大優(yōu)點是在開放式培養(yǎng)或細胞觀察時能維持較恒定的PH值.在這種培養(yǎng)條件下,細胞培養(yǎng)瓶的蓋子應(yīng)擰緊,以防止培養(yǎng)液中所需的少量碳酸鹽散入空氣中.大多數(shù)培養(yǎng)液中含有酚紅作為pH指示劑,酸性培養(yǎng)液呈橙黃色,堿性培養(yǎng)液呈深紅色.HEPES有些昂貴,在高濃度時對一些細胞可能有毒. 原則上,HEPES作為緩沖劑可用來代替碳酸氫鹽，以解除需要高濃度CO2培養(yǎng)環(huán)境的限制.實際操作中并非如此簡單. 溶解的CO2與碳酸氫鹽對良好的細胞生長也是很重要的。 HEPES buffer緩沖溶液的配制方法關(guān)于HEPES 緩沖溶液的配制，不同的文獻資料有不同的說法。根據(jù)用途，一種是單純的HEPES+NaOH，另一種是HEPES+鹽。各種配制方法總結(jié)如下： (1)HEPES可按所需的濃度直接加入到配制的培養(yǎng)液中,再過濾除菌.每1000ml培養(yǎng)液中加入2.38克HEPES,待溶后用lN NaOH 調(diào)pH至7.2,濾過除菌后使用.此時HEPES的使用濃度為10 mmol/L. (2)亦可配成 100 x 貯存液（l mol/L），使用前取 99ml培養(yǎng)液加入 lml貯存液，zui終應(yīng)用濃度仍為10mmol/L。l mol/L（100 x）HEPES貯存液配制方法:取23.8g HEPES溶于90ml雙蒸水中,用lN NaOH調(diào)pH至7.5一8.0,然后用水定容至100ml,過濾除菌,分裝小瓶（2ml/瓶）,4℃或-20℃保存.用途：對細胞無毒性作用。它是一種氫離子緩沖劑，能較長時間控制恒定的pH范圍。使用終濃度為10-50mmol/L，一般培養(yǎng)液內(nèi)含20mmol/LHEPES即可達到緩沖能力。
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