甲胎蛋白(AFP)放免檢測服務(wù)超便捷!?
甲胎蛋白是一種糖蛋白,它屬于白蛋白家族,主要由胎兒肝細(xì)胞及卵黃囊合成。甲胎蛋白在胎兒血液循環(huán)中具有較高的濃度,出生后則下降,至生后2~3月甲胎蛋白基本被白蛋白替代,血液中較難檢出,故在成人血清中含量極低。甲胎蛋白具有很多重要的生理功能,包括運(yùn)輸功能、作為生長調(diào)節(jié)因子的雙向調(diào)節(jié)功能、免疫抑制、T淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)凋亡等。
[使用目的]
用于人血清樣本中甲胎蛋白的定量測定
[試驗(yàn)原理]
血清中甲胎蛋白的檢測主要用于 1、原發(fā)性肝細(xì)胞癌的診斷和監(jiān)測。AFP 的測定為原發(fā)性肝細(xì)胞癌的早期診斷和監(jiān)測及肝癌流行病調(diào)查和理論研究提供了重要依據(jù),是、zui有用的腫瘤標(biāo)志物之一。2.通過血清及羊水 AFP 的檢測對(duì)先天性胎兒畸形的早期診斷有實(shí)用價(jià)值。
本品采用了第二抗體+聚已二醇沉淀法放射免疫分析試驗(yàn)原理:含甲胎蛋白的樣品和 125I 標(biāo)記的甲胎蛋白與相應(yīng)的抗體反應(yīng)形成抗原抗體復(fù)合物。反應(yīng)后加入二抗及 PEG,使免疫復(fù)合物沉淀,離心,測沉淀放射性計(jì)數(shù)。通過標(biāo)準(zhǔn)曲線得到樣本中 AFP的濃度。
[實(shí)驗(yàn)方法]
1、 將實(shí)驗(yàn)所需試劑及樣本放置室溫,平衡至少 30 分鐘以上才可進(jìn)行操作;
2、 取 60X12mm 聚苯乙烯管進(jìn)行編號(hào),所有實(shí)驗(yàn)均做雙管重復(fù);
3、 取每個(gè)濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控血清和樣本 100µl 加入相應(yīng)編號(hào)的試管中;
4、 每管均各加入 100µl 標(biāo)記物工作液;
5、 每管均各加入 100µl 抗體工作液,充分混勻;
6、 37℃溫育 3 小時(shí);
7、 每管均各加入 500µl 分離劑后,充分混勻;
8、 室溫放置 30 分鐘后,離心 3500 轉(zhuǎn)/分,20 分鐘后,吸去或傾倒掉上清液;
9、 用 γ-計(jì)數(shù)器測定每管 1 分鐘的放射性強(qiáng)度計(jì)數(shù);
10、 從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取樣本及質(zhì)控血清的濃度。
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