分泌型堿性酶(SEAP)的用途!
分泌型堿性酶(secreted alkaline phos-phatase,SEAP)是人胎盤堿性酶的突變體,大特點(diǎn)是能由表達(dá)細(xì)胞分泌到細(xì)胞外。檢測時可在不破壞細(xì)胞的情況下,任意時間點(diǎn)取細(xì)胞培養(yǎng)上清液進(jìn)行重復(fù)、動態(tài)的檢測,且被檢測細(xì)胞還可繼續(xù)其他用途。使用發(fā)光檢測方法可以進(jìn)一步提高SEAP的檢測靈敏度。
在外源基因轉(zhuǎn)錄活性研究中,報告基因發(fā)揮了很重要的作用。分泌型堿性酶報告基因系統(tǒng)是研究體外轉(zhuǎn)錄活性的有效工具。
本酶為人胎盤堿性酶缺失了細(xì)胞膜結(jié)合部位的突變蛋白,熱穩(wěn)定性比多數(shù)細(xì)胞產(chǎn)生的內(nèi)在堿性酶的同工酶高。SEAP(分泌型堿性酶)是今年來廣泛注目的報告基因,由于其能夠直接分泌到細(xì)胞外,不需要常見的報告基因檢測中所需要的細(xì)胞裂解操作,可以用于同一樣品中基因表達(dá)隨時間變化的檢測。